一、開機:
1、打開電腦;
2、打開液相色譜各個模塊的電源;
3、雙擊桌面“LC1260(Online)",進入聯機界面;
二、排氣:
1、手動旋開泵處沖洗閥(逆時針旋轉約1圈)
2、右鍵單擊“Pump"圖標銷售,選擇“Method"選項,進入泵編輯畫面,設流速:5ml/min,點擊“確定";
3、右鍵單擊“Pump" 圖標銷售,點擊“Control"選項,選中“ON",點擊“確定",則系統開始沖洗,直到
管線內(由溶劑瓶到泵入口)無氣泡為止(一般為5分鐘),切換通道繼續沖洗,直到所有要用通道
無氣泡為止;
4、右鍵單擊“Pump" 圖標,點擊“Method"選項,設流速:0ml/min,手動旋緊沖洗閥;
5、右鍵單擊“Pump"圖標,點擊“Method"選項,按照方法要求選擇合適比例的流動相,設流速:1.0ml/min;(不一定是1);
6、同理右鍵單擊“Column Comp",“DAD"圖標,點擊“Method"選項,按照;
7、方法的要求設置溫度,波長,點擊“控制" 選項,“ON"打開柱溫箱和檢測器;
三、編輯方法:
1、點擊“Method"—— “Edit EntireMethod"開始編輯完整方法;
2、選中除“Data Analysis "外的三項,進入下一選項卡,選擇“Als"(自動進樣),點擊“OK",進入下一選項;
3、選擇“Method"菜單下“Method Information"選項,在“Method Comments"中加入方法的信息(如:
This is for test!),選擇“OK",進入下一選項;
4、泵參數設定:右鍵單擊“Pump"圖標,點擊“Method…"選項,設置“Flow":如1.0ml/min;“Stop
Time":如10 min(該停止時間僅為做一個樣品需要的時間),按照要求選擇合適比例的流動相配
比,選擇“OK",進入下一選項;
5、自動進樣器參數設定:右鍵單擊“Sampler"圖標,點擊“Method"選項,選擇“Injection volume",輸
入進樣體積,選擇“OK",進入下一選項;
6、柱溫箱參數設定:右鍵單擊“Column Comp",點擊“Method"選項,設置“Left"溫度(可設置溫度范
圍:低于室溫10℃-80℃),一般“Left"和“Right"溫度一致,選擇“Combined"綁定即可,“Stop
Time"選擇“As Pump /Injector",選擇“OK",進入下一選項;
7、UV檢測器參數設定: 右擊“DAD" ,點擊“Method…"選項,下方的空白處輸入所需的檢測波長(可
根據需要選擇多個波長,多可選8個波長);“Stop Time"選擇“As Pump /Injector";“Spectrum"
——“Store"選項下,根據需要選擇 “None"或“All(全波長掃描)"等選項,選擇“OK",進入下一選
項;
8、編輯方法完畢,從“Method"菜單中,選中“Save Method As",輸入一方法名,選擇“OK",保存方
法成功。
9、單針進樣
10、從“Run Control"菜單中,選擇“Sample Information"選項,輸入“Operator Name";在“Data File"中
選擇“Path"和 “Prefix/Counter(文件命名)"設置“Prefix(一般設置為年月日)"和“Counter";輸
入“Location(樣品位置)"和“Sample Name",選擇“OK",進入下一選項;
11、基線平穩后選擇“Run Control"中的“Run Method"選項,開始進樣。
四、序列進樣:
1、選擇“Sequence"菜單下“ Sequence Table"選項,在“Confiqure Table"中選擇需要選項,一般
為“Vial(樣品瓶)",“Sample Name(樣品名稱)",“Method Name(方法名稱)",“Inj/Vial(進樣次
數)",“Sample Type(樣品類型)",“Datafile(文件名)"和“Inj Volume(進樣體積)";
2、點擊“Inset"生成一行,設置上述參數,選中該行,點擊“Copy"和“Paste"復制后修改相應參數,即
生成序列表,選擇“OK",進入下一選項;
3、點擊“Sequence"菜單下“ Sequence Parameters"選項,選擇序列數據的“Path"(序列會自動生成
以“序列名稱-時間"為名稱的文件夾保存數據),數據建議選擇 “Prefix/Counter"保存;
在“Shutdown"選項下選中“Post-Sequence Command/Macro",根據需要選擇“PUMPALL OFF(序列
結束后關閉泵)"" “LAMPALL OFF(序列結束后關閉紫外燈)"" “STANDBY(序列結束后關閉紫外燈
和泵)",選擇“OK",進入下一選項;(注:若“Path"中默認保存于C盤,則可點擊“View",選
擇“Preferences",根據需要添加相應的“SequenceTemplates"“Data"“Master Methods"保存路徑)
4、從“Sequence"菜單,選中“Save Sequence Template As",輸入一序列名,選擇“OK",即可;
5、基線平穩后選擇“Run Control"中的“Run Sequence"選項,開始序列進樣。
(注:若中途停止運行,則選擇“Run Control"中的“Stop Run/Inject/ Sequence"可保留圖譜信息,若選
擇Abort,則所有圖譜信息都丟失)
五、數據分析(脫機狀態使用):
1、雙擊“LC1260(Offline)"圖標進入的脫機畫面
2、從“View"菜單中,點擊“Data Analysis"進入數據分析畫面
3、從“File"菜單選擇“Load Signal",選中所需的數據文件名,點擊“OK",則數據被調出。
4、譜圖優化:從“Graphics"菜單中選擇“Signal Options"。從“范圍" 中選擇“Full"或“Use Ranges" 選擇
所需“Time Range"和“Response Range",選擇“OK";從“Integration"中選擇“Integration Events",調
整“Area Reject"和“Height Reject"刪除雜峰;點擊“Set Integration"圖標,可選擇性消除不需要的積
分,若想消除該操作,則選擇“Method Manual Events"上排左起第5個圖標進行移除操作即可,點擊
左邊“√"圖標,將積分參數存入方法并退出“Integration Events"。
(注:“Set Integration"圖標為)
六、標準曲線繪制:
1、選擇“Calibration"菜單下“New Calibration Table",選擇“Automatic Setup"中“Level(即標曲中對應
的點,個點即為1)"和“Defanlt Amount(標準品對應點的濃度)",選擇“OK";
2、通過選擇“Calibration"菜單下的“Add Level"選項依次添加各點參數,若為外標法,在“ISTD"項下
選“NO",若為內標法則選“Yes";“#"項下對應標準品和內標無的數字的應統一;若想更改標準曲線中
的對應點;
3、選擇“Calibration"菜單下的“Recalibrate"項的“Mode"選項,選擇“Average"則表示取當前點與標曲
中對應點的平均值替代標曲中原對應點,若選擇“Replace"則表示將當前點取代標曲中對應點;
(注:修改“Defanlt Amount"中濃度單位的方法:選擇“Calibration"項下“Calibration Setting",修
改“Amount Units",設置濃度單位;選擇“Calibration"項下“Calibration Setting",修改“Default
CalibrationCurve",選擇合適的曲線類型-Type,是否過原點-Origin和各點對于標準曲線的比重-
Weight,通常選Equal)
4、調出樣品譜圖,點擊需要計算濃度的色譜峰,選擇“Report" 菜單中的“Specify Report",選
擇“Report style"為“Detail",點擊“OK"后選擇“打印預覽"圖標,在報告中即可體現計算結果。
七、 圖譜重疊設置:
1、選擇“File"菜單下“Overlay Signal"選項,選擇任意需要重疊的圖譜;
2、在“Signal"選項下,選擇“3D Signal Overlay"圖標(緊鄰圖譜上方左起第四個圖標),在彈出
的“Adjust Signal OverlayOptions"對話框中調節交錯時間和高度;若想移除重疊譜圖,點擊第六個圖
標。
八、信噪比等參數計算:
1、選擇“Report"菜單中的“System Suitability"項下的“Edit Noise Range"選項,設置時間范圍(超過
1min);
2、選擇“Report" 菜單中的“Specify Report",選擇“Report style"為“Perfomance+Noise",點
擊“OK"后,即可預覽信噪比參數;
3、選擇“Report" 菜單中的“Specify Report",選擇“Report style"為“Extended Perfomance",點
擊“OK"后,即可預覽對稱性、拖尾因子等所有參數。
九、程序運行時檢測出峰情況:
選擇“File"菜單下的“Snapshot"選項即可。
十、打印報告:
1、從“Report"菜單中選擇“Report Mode",選擇“Use Classic Reporting";
2、從“Report"菜單中選擇“打印報告",則報告結果將被打印。
十一、關機:
1、沖洗色譜柱和系統后,退出化學工作站及其它窗口,關閉計算機;
2、關閉Agilent 1260各模塊電源開關。